En 1918, Florence Eldridge débute au théâtre à Broadway, dans une comédie musicale. Elle joue ensuite sur les scènes new-yorkaises exclusivement dans des pièces, vingt-deux au total. La dernière est la création à Broadway, en 1956, de Long Day's Journey Into Night (Le Long Voyage vers la nuit) d'Eugene O'Neill -- qui lui vaut une nomination au Tony Award de la meilleure actrice en 1957 --, jouée 390 fois jusqu'en 1958, aux côtés de son mari,
Fredric March (tout comme les huit pièces précédentes : voir la rubrique "Théâtre" ci-dessous).
Au cinéma, Florence Eldridge participe à dix-huit films seulement -- dont sept avec son époux --, le premier (muet) en 1923, les suivants en 1929 et dans les années 1930, avant quatre derniers films en 1948, 1949 et 1960. Notons qu'elle personnifie la reine Élisabeth Ire d'Angleterre en 1936, dans
Marie Stuart, puis la reine Isabelle Ire de Castille en 1949, dans Christophe Colomb (où Fredric March interprète le rôle-titre).
À la télévision, dans les années 1950, elle participe à quatre séries dédiées au théâtre, avant une ultime apparition à l'écran en 1978, dans un téléfilm de George Schaefer, First, you cry.